الكيماويات في زراعة الانسجة

الكيماويات الغير عضوية Inorganic chemicals

العناصر الكبرى :

النيتروجين Nitrogen ( N )	أهميته: أساس في تركيب الكلورفيل – القلويدات – الأحماض النووية والأمينية – الهرمونات زيادته : تشجع النمو وتمنع الإثمار . نقصه : يسبب إصفرار الأوراق ويعوق النمو مصدره : (NH4) الأمونيوم – ( NO3 ) النترات .
الفوسفور ( P )	أهميته : متوفر في الخلايا المرستيمية والسريعة النمو نقصه : يسبب مرض النبات وضعفه وجعله غير طبيعي مصدره ( صورته ) : فوسفات صوديوم ، فوسفات بوتاسيوم .
البوتاسيوم ( K )	أهميته : ضروري لانقسام الخلية العادية – تخليق الكربوهيدرات – البروتينات – تصنيع الكلورفيل نقصه : ضعف النبات – جعله غير طبيعي مصدره ( صورته ) : فوسفات بوتاسيوم ، كلوريد بوتاسيوم ، نترات بوتاسيوم .
الكبريت ( S )	أهميته : يشجع نمو الجذور – واخضرار النموات الجديدة صورته : كبريتات ( So4 )
الكالسيوم (Ca )	أهميته : تدخل في تركيب الجدر الخلوية للنبات – تشجع نمو الجذور صورته : كلوريد كالسيوم ca cl2  ، نترات كالسيوم .
الماغنسيوم ( Mg )	أهميته : أساس في تركيب الكلورفيل ومنشط إنزيمي مهم نقصه : يسبب بهتان ومرض النبيتات الصغيرة صورته : كبريتات ماغنسيوم .
الحديد ( Fe )	أهميته : يشترك في بناء الكلورفيل – ضروري في عملية البناء الضوئي والتنفس نقصه : يسبب اصفرار وبهتان صورته : كبريتات حديدوز مخلوط مع EDTA

العناصر الصغرى :

تضاف مع العناصر الكبرى للحصول على نمو جيد وتضاف بكمية صغيرة

البورون	أهميته: يلعب دور في انتقال السكر نقصه : أعراض مختلفة في الأنسجة الداخلية زيادته : موت النبات . صورته : حمض البوريك ( H3 Bo3 )
المولبيدنم	أهميته : له دور في تحويل النيتروجين ------ أمونيا – مطلوب للنمو الجيد . صورته : مولبيدات صوديوم .
المنجنيز	أهميته : ضروري في أغشية الكلوروبلاست . نقصه : يسبب اصفرار أطراف الأوراق . صورته : كبريتات منجنيز .
الكوبلت	أهميته : يدخل في تركيب Vt. B12 – يثبت النيتروجين . صورته : كلوريد كوبالت ( Ca cl2 )
الزنك	أهميته : عنصر جوهري لعدة إنزيمات – يشترك في تكوين الكلورفيل – إنتاج الأوكسينات IAA   زيادته : تسمم النبات . صورته : كبريتات زنك Zn So4
النحاس	أهميته : ضروري في تحولات الطاقة حيث يتحول من نحاسوز ــــــــ نحاسيك نقصه : إعاقة النمو – تبقع الأوراق – موت النموات الحديثة . صورته : كبريتات نحاس ( Cu So4 . 5H2o )  .
الكلور	أهميته : ضروري لعملية البناء الضوئي . نقصه : التفاف الأوراق وتحولها للإصفرار أو البرونزي ثم الموت صورته : كلوريد كالسيوم Ca Cl2

المواد الكيماوية العضوية

-         هي مركبات تحتوي على الكربون مثل الكربوهيدرات – الهرمونات – الإنزيمات

-         وتضاف في البيئة الغذائية لتشجيع النباتات الصغيرة على النمو وتجديد نفسها .

الكربوهيدرات	-         تحتوي على السكريات والنشا والسليلوز بكميات مختلفة . -         وتحتوي هذه المركبات على ذرة كربون – هيدروجين – اكسجين وهي عناصر أساسية لتكوين جزئي هذه المواد . ويستخدمها النبات طبيعيا من الهواء والماء .
السكروز	-         يوجد بوفرة في أنسجة النبات وتضع في الخلية في عملية التمثيل الضوئي بمساعدة الكلورفيل – الضوء -         لكن لا تصنع كل السكريات المطلوبة في بيئة زراعة الأنسجة -         ويعتبر إضافة السكروز بتركيز 30 مم/ لتر مناسب في بيئة زراعة الأنسجة .
فيتامين (ب) المركب V.B complex	-         يحتوي على مركبات أساسية وضرورية لعمليات بناء ونمو النبات . -         ويوجد في مستخلص الخميرة – الثيامين – البيرودكسين – السيكوتنيك .
أنيستول	-         أحد فيتامين (ب) المركب – يوصف على أنه سكر كحولي في صورة فوسفات -         يوجد في الأغشية والأعضاء التي يوجد بها مثل الكلوربلاست . -         يضاف 100ملجم / لتر .
الثيامين	-         يعمل كمرافق إنزيمي في دورة الأحماض العضوية ( دورة كرب ) للتنفس -         يضاف 4ملجم / لتر .
حامض نيكوتنيك	-         مرافق إنزيمي نشط في تفاعلات الطاقة الضوئية -         يضاف 1-10ملجم / لتر
البيرودكسين	-         مرافق إنزيمي في تفاعلات البناء والهدم .
حامض بانتوثنيك	-         مرافق إنزيمي في عمليات الهدم والبناء للدهون -         يضاف في صورة أملاح كالسيوم .

منظمات النمو growth regulators

-         تعتبر الأوكسينات والسيتوكينينات هرمونات أساسية أو منظمات نمو

-         الأوكسين يشجع تكوين الجذور واستطالة الخلايا والستوكينينات تشجع انقسام الخلايا والنمو الخضري .

الأوكسينات	-         عرف IAA  بالأوكسين الطبيعي واستخلص من نمو الريشة في الشوفان . -         وخلفت أكسينات صناعية مثل اندول بيوتريك أسيد IBA ، نفثالين أسيتك أسيد -         وجد أن هذه المواد لها تأثير أكبر من IAA  في كبر الخلايا ونشوء الجذر . -         IAA – NAA  منتشرة في حث العقلة على التجذير -         يستخدم في البيئة مع السيتوكينينات أثناء مرحلة زيادة الخلايا .
السيتوكينينات	-         تعتبر تشجع من انقسام الخلية ويساعد في إنبات البذرة ويؤثر في تساقط الأوراق -         يؤثر على انتقال الأوكسين – ويسمح لعمل الجيرلين عن طريق منع نشاط المثبطات . -         وأيضا تحتاجه البيئة لزيادة النمو الخضري ويحذف في مرحلة التجذير .
الأدنين	-         مهم للخلايا كجزء من المواد المكونة للنواه . -         ويستخدم الأدنين سلفات ليساعد على تشجيع النمو الخضري .
الجبرلينات	مجموعة من المواد الطبيعية تؤثر على استطالة الخلية -         بعض هذه الجبرلينات ظهرت في الأجنة حيث تكون أساسية لإنتاج إنزيم ألفا اميليز الذي يحول النشا إلى سكر وتراكم إنزيمات أخرى -         يستخدم GA­3 غالبا كمنظم نمو تكميلي مع الأوكسينات والستوكينينات  وبيئة الزراعة
2.4 D	2 ، 4 داي كلوروفينوكس أسيتيك أسيد 2.4 D معروف كمبيد حشائش – يستخدم في بيئات الزراعة خاصة في إنتاج الكالس

بالإضافة إلى الأحماض الأمينية ، السيستين ، الجليسين

المكونات الغير محددة في بيئة زراعة الأنسجة

·       لبن جوز الهند : يستعمل بنجاح في الزراعة الأولية لأنسجة النبات

-         ووجوده في البيئة انتجت الكالس أكثر من المحتوى على الزاياثين – انيستول – كازين IAA  

·       الكاذين : Casien hydrolysate

-         مخلوط من البروتين الغير محددة – تستخدم أحيانا في البيئة .

-         مأخوذة من اللبن معامل بالماء ليكون حمض ضعيف .

·       مستخلص الخميرة

مصدر طبيعي للفيتامينات .

·       الأجار:

-         مخلوط من السكريات العديدة المستخلصة من عدة أنواع من الطحالب الحمراء

-         يكون الآجار في البيئة قوي ومتماسك ويجعل البيئة قادرة على رفع الغذاء إلى النبات المتكون .

-         اكتشف في بعض الآجار سلفات – كالسيوم . ماغنسيوم – أيونات حديد .

-         والآجار الصلب النقي هو المستعمل غالبا في بيئة زراعة الأنسجة . ويستعمل بتركيز 6مجم / لتر في البيئة

-         وتختلف نوع الآجار وقوة التماسك باختلاف صفات النبات والبيئة المستخدمة ، البيئة المنخفضة في الأملاح أو الهرمونات تميل إلى الصلابة أكثر من المحتوية على هرمونات وأملاح كاملة .

·       الفحم النباتي النشط :

يضاف في بيئة التجذير . ووظيفته غير واضحة إلا أنه يمتص المواد المثبطة للتجذير ويقلل من تكون اللون البني .

طريقة عمل  Buffer للـــ PH

-         تؤخذ الكبسولة سواء كانت ( PH = 7 , PH = 4)  ويفرغ محتوياتها في 50سم³ ماء مقطر وتذاب ثم يكمل الحجم إلى 100سم ما مقطر . بعد ذلك تقاس بها وتضبط PH حسب نوع الكبسولة

-         لكي تحفظ الـــ Buffer يجب وضعه في الثلاجة حتى الاستعمال .

-         قبل الاستعمال مباشرا يجب أن يبرد حتى تصل درجة حرارته مثل حرارة الغرفة ثم يستعمل .

كيفية عمل محلول عياري من KOH و Hcl

الوزن الجزيئي KOH = K(39) + (o)(16) + H (1) = 56

يوزن 5.6 جرام وتزاب في 50سم³ ماء مقطر ثم يكمل الحجم إلى 100سم³ بالماء المقطر . وذلك يصبح المحلول = 1ع = N1

إذا كان عايز محلول = 2ع  أضرب الوزن الجزيئي × 2

إذا كنت عايز تعمل محلول مخفف من KOH  = 0.1 ع و Hcl = 0.1ع  وذلك لاستخدامه في ضبط المحلول عند الـــ PH

يؤخذ  5.6 جم KOH ويذوب ويكمل إلى لتر ـــــــــ تعطي KOH (0.1 ع )

يؤخد  10سم  Hcl ويكمل إلى لتر ــــــــــ يعطي Hcl ( 0.1 ع )